Принцип реакции состоит в том, что определенная концентрация водного раствора сулемы вызывает помутнение (флокуляцию) сыворотки.
Результат выражается в количестве миллиметров раствора сулемы, потраченных на образование флокуляции. У здоровых людей показатели сулемовой пробы колеблются между 1,8 и 2,5 мл 0,1 %-ного раствора сулемы, по другим исследователям-1,5-2,5 мл раствора сулемы, по нашим данным-1,86±0,05 мл. Показатели ниже 1,5 мл раствора сулемы считаются положительными и указывают на поражение паренхимы печени. Низкие цифры встречаются при инфекционном гепатите: в этих случаях сулемовая проба доходит до 1 мл. По мере выздоровления уровень сулемовой пробы нормализуется.
Некоторые исследователи полагают, что сулемовая проба более чувствительна, чем реакция Таката-Ара. Она может служить для дифференциального диагноза между болезнью Боткина и механической желтухой. При инфекционном гепатите в начале заболевания проба бывает резко положительной, а при благоприятном течении болезни она становится менее интенсивной. В начале заболевания механической желтухой сулемовая проба выпадает в пределах нормальных величин, а в дальнейшем она постепенно становится положительной и развивается параллельно с разрушением печеночной паренхимы в результате закупорки протока.
Показатели сулемовой пробы изменяются и при ревматических заболеваниях. По данным Т. М. Трофимовой (1961), указанная проба положительная в 42% больных ревматизмом и ревматоидным артритом. В. Н. Дзяк и Е. И. Емельяненко (1965) из 43 больных ревматизмом у 16 обнаружили положительные результаты, а у 27 - отрицательные.
Состояние сулемовой пробы
Одновременно авторы считают, что результаты этой реакции мало убедительны и часто не совпадали с клиническим течением заболевания. Поэтому эту пробу они считают мало ценной для определения активности ревматического процесса. Наоборот, по мнению Т. М. Трофимовой, отмечается корреляция результатов сулемовой пробы и активности ревматизма. Кроме того, показатели сулемовой пробы наряду с другими тестами позволяют судить о белково-образовательной функции печени при ревматических заболеваниях.
Нами изучено состояние сулемовой пробы у 92 больных ревматоидным полиартритом в процессе лечения. Исследования показали, что у больных ревматоидным полиартритом сулемовая проба оказалась положительная в 2/3 случаев и составляла 1,5±0,04 мл. У больных с минимальной и умеренной степенью активности заболевания указанная проба была незначительно снижена по сравнению со здоровыми. Что касается больных с максимальной степенью, то оказалось, что сулемовая проба до лечения была значительно снижена (1,1 ±0,1 мл). В процессе лечения отмечалась только тенденция к увеличению показателя, но он не приходил к нормальным величинам. Таким образом, можно рекомендовать применение сулемовой пробы для определения активности ревматизма и ревматоидного полиартрита.
Кадмиевая проба -неспецифическая осадочная реакция для диагностики некоторых заболеваний печени, протекающих с увеличением в основном у-глобулинов. Она предложена в 1945 г. Вурман и Вундерли и технически легко выполняется. Кровь на кадмиевую пробу следует брать натощак. Обычно реакция положительна при циррозах печени, раке легкого, инфекционных заболеваниях, эндокардитах, хронических нефритах. М. Д. Михайлов (1964) указывает, что при активной форме ревматизма кадмиевая проба часто может быть положительной. Автором было обследовано 30 больных затяжным септическим эндокардитом и у всех была найдена положительная проба.
Применение осадочных проб с диагностической целью основано на изменении коллоидоустойчивости белков плазмы при некоторых заболеваниях, что обусловлено изменением соотношения альбумин/глобулины, либо исключительно сдвигом уровня γ‑глобулинов. В норме белки плазмы крови находятся в виде коллоидов, что обеспечивается зарядом на поверхности белковой частицы и ее гидратной оболочкой. Известно, что нарушение коллоидоустойчивости сыворотки под действием какого‑либо реактива сопровождается сначала коагуляцией (склеиванием), а затем флокуляцией (осаждением). Такое нарушение можно вызывать:
- уменьшением заряда - применение электролитов, например, СaCl 2 , CdSO 4 ;
- снижением содержания гидратационной воды в коллоидах - при помощи органических растворителей, концентрированных растворов электролитов, спирта;
- увеличением размера частиц - денатурация органическими кислотами, солями тяжелых металлов (соли ртути), при нагревании.
При добавлении к сыворотке некоторых органических веществ (тимола) также наступает преципитация белков, приводящая к помутнению или образованию хлопьев.
В качестве унифицированных методов утверждены тимоловая проба, сулемовая проба, проба Вельтмана.
Тимоловая проба
Принцип
Сывороточные γ‑глобулины и липопротеины осаждаются при рН 7,55 тимоловым реактивом. В зависимости от количества и взаимного соотношения отдельных белковых фракций возникает помутнение, интенсивность которого измеряют турбидиметрически.
Нормальные величины
| Сыворотка | 0‑4 ед.S‑H |
Клинико‑диагностическое значение
Как и все коагуляционные тесты, тимоловая проба является неспецифической реакцией. Вместе с тем, она гораздо более специфична для функционального исследования печени, чем другие коллоидные пробы и применяется для дифференциальной диагностики заболеваний печени. При поражении паренхимы печени (инфекционный и токсический гепатит) уже в преджелтушной стадии или при безжелтушной форме в 90‑100% случаев тимоловая проба выше нормальных величин. У здоровых индивидов, при остальных заболеваниях печени (механическая желтуха) или нарушении функции других органов тимоловая проба соответствует норме.
Проба Вельтмана
Принцип
При добавлении к сыворотке крови раствора СаСl 2 и нагревании снижается коллоидная устойчивость белков.
Нормальные величины.
Клинико‑диагностическое значение.
Изменение коагуляционной ленты Вельтмана свидетельствует об изменении соотношения альбумины/глобулины.
Сдвиг вправ о или расширение (уменьшение количества затраченного СаCl 2) означает повышение содержания глобулиновой фракции, в первую очередь иммуноглобулинов, или снижение альбуминовой: наблюдается при фиброзах, гемолизе, повреждениях печени (болезнь Боткина, цирроз, атрофия), пневмонии, плеврите, туберкулезе.
Сулемовая проба
Осадочная проба, применяемая при функциональном исследовании печени. Норма 1,6 - 2,2 мл. Проба положительна при некоторых инфекционных болезнях, паренхиматозных заболеваниях печени, новообразованиях.
Проба Вельтмана
Коллоидно-осадочная реакция для исследования функций печени. Норма 5 - 7 пробирка.
Формоловая проба
Метод, предназначенный для выявления нарушения равновесия протеинов , содержащихся в крови. В норме проба отрицательная.
Серомукоид
- является составной частью белково-углеводного комплекса, участвует в белковом обмене. Норма 0,13 - 0,2 ед. Повышенное содержание серомукоида указывает на ревматоидный артрит , ревматизм , опухоли и др.
С-реактивный белок
Белок, содержащийся в плазме крови, является одним из белков острой фазы. В норме отсутствует. Количество С-реактивного белка увеличивается при наличии в организме воспалительных процессов.
Гаптоглобин
Белок плазмы крови, синтезируемый в печени, способный специфически связывать гемоглобин . Нормальное содержание гаптоглобина составляет 0,9 - 1,4 г/л. Количество гаптоглобина увеличивается при острых воспалительных процессах, применении кортикостероидов, ревмокардите, неспецифическом полиартрите, лимфогранулематозе, инфаркте миокарда (крупноочаговом), коллагенозах, нефротическом синдроме, опухолях. Количество гаптоглобина снижается при патологиях, сопровождаемых различными видами гемолиза, заболеваниях печени, увеличении селезёнки и др.
Креатинин в крови
Является продуктом белкового обмена. Показатель, отображающий работу почек. Содержание его сильно варьирует в зависимости от возраста. У детей до 1 года в крови содержится от 18 до 35 мкмоль/л креатинина, у детей от 1 до 14 лет - 27 - 62 мкмоль/л, у взрослых - 44 - 106 мкмоль/л. Повышенное содержание креатинина наблюдается при поражении мышц, обезвоживании организма. Низкий уровень характерен для голодания , вегетарианской диеты , беременности.
Мочевина
Вырабатывается в печени в результате белкового обмена. Важный показатель для определения функциональной работы почек. Норма 2,5 - 8,3 ммоль/л. Повышенное содержание мочевины указывает на нарушение выделительной способности почек и нарушение фильтрационной функции.
Показатели пигментного обмена:
Общий билирубин
Жёлто-красный пигмент, который формируется в результате распада гемоглобина. В норме содержится 8,5 - 20,5 мкмоль/л. Содержание общего билирубина встречается при любом виде желтухи .
Прямой билирубин
Норма 2,51 мкмоль/л. Повышенное содержание данной фракции билирубина наблюдается при паренхиматозной и застойной желтухе. Непрямой билирубин - Норма 8,6 мкмоль/л. Повышенное содержание данной фракции билирубина наблюдается при гемолитической желтухе.
Метгемоглобин
Норма 9,3 - 37,2 мкмоль/л (до 2 %).
Сульфгемоглобин
Норма 0 - 0,1 % от общего количества.
Показатели углеводного обмена:
Глюкоза
- является первостепенным источником энергии в организме. Норма составляет 3,38 - 5,55 ммоль/л. Повышенное содержание глюкозы в крови (гипергликемия) указывает на наличие сахарного диабета или же на нарушенную толерантность к глюкозе, хронические заболевания печени, поджелудочной железы и нервной системы. Уровень глюкозы может снижаться при усиленных физических нагрузках, беременности, долгом голодании, некоторых заболеваниях желудочно-кишечного тракта, связанных с нарушенным всасыванием глюкозы.
Сиаловые кислоты
Норма 2,0 - 2,33 ммоль/л. Увеличение их количества связано с такими заболеваниями, как полиартрит, ревматоидный артрит и др. Связанные с белком гексозы
Норма 5,8 - 6,6 ммоль/л.
Связанные с серомукоидом гексозы
Норма 1,2 - 1,6 ммоль/л.
Гликозилированный гемоглобин
Норма 4,5 - 6,1 молярных %.
Молочная кислота
Продукт распада глюкозы. Является источником энергии, необходимой для работы мышц, мозга и нервной системы. Норма 0,99 - 1,75 ммоль/л.
Показатели липидного обмена:
Общий холестерин
Важное органическое соединение, являющееся компонентом липидного обмена. Нормальное содержание холестерина составляет 3,9 - 5,2 ммоль/л. Повышение его уровня может сопровождать следующие заболевания: ожирение , сахарный диабет, атеросклероз , хронический панкреатит , инфаркт миокарда, ишемическая болезнь сердца, некоторые болезни печени и почек, гипотиреоз, алкоголизм , подагра .
Холестерин альфа-липопротеидов (ЛПВП)
Липопротеиды высокой плотности. Норма 0,72 -2, 28 ммоль/л.
Холестерин бета-липопротеидов (ЛПНП)
Липопротеиды низкой плотности. Норма 1,92 - 4,79 ммоль/л.
Триглицериды
- органические соединения, выполняющие энергетическую и структурную функции. В норме содержание триглицеридов зависит от возраста и пола.
до 10 лет 0,34 - 1,24 ммоль/л
10 - 15 лет 0,36 - 1,48 ммоль/л
15 - 20 лет 0,45 - 1,53 ммоль/л
20 - 25 лет 0,41 - 2,27 ммоль/л
25 - 30 лет 0,42 - 2,81 ммоль/л
30 - 35 лет 0,44 - 3,01 ммоль/л
35 - 40 лет 0,45 - 3,62 ммоль/л
40 - 45 лет 0,51 - 3,61 ммоль/л
45 - 50 лет 0,52 - 3,70 ммоль/л
50 - 55 лет 0,59 - 3,61 ммоль/л
55 - 60 лет 0,62 - 3,23 ммоль/л
60 - 65 лет 0,63 - 3,29 ммоль/л
65 - 70 лет 0,62 - 2,94 ммоль/л
Увеличение уровня триглицеридов в крови возможно при остром и хроническом панкреатите, атеросклерозе, ишемической болезни сердца, гипертонии , сахарном диабете, алкоголизме, гепатите, циррозе печени, ожирении, тромбозе сосудов мозга, подагре, хронической почечной недостаточности и др.
Фосфолипиды
Норма 2,52 - 2,91 ммоль/л
Неэтерифицированные жирные кислоты
400 - 800 мкмоль/л
Ферменты:
АЛАТ - аланинаминотрансфераза.
Фермент, необходимый для определения функционального состояния печени. Нормальное содержание в крови 28 -178 нкат/л. Повышенное содержание АЛАТ характерно для инфаркта миокарда, поражения сердечных и соматических мышц.
АСАТ - аспартатаминотрансфераза.
Норма 28 - 129 нкат/л. Увеличивается при патологиях печени.
Липаза
Фермент, участвующий в расщеплении липидов, синтезируемый поджелудочной железой. Норма 0 - 190 ед/мл. Липаза повышается при панкреатите, опухолях, кистах поджелудочной железы, хронических заболеваниях желчного пузыря, почечной недостаточности, эпидемическом паротите, инфаркте, перитоните . Понижается - при любых опухолях, за исключением рака поджелудочной железы.
Амилаза
- пищеварительный фермент, расщепляющий крахмал, синтезируемый поджелудочной железой и слюнными железами. Норма альфа-амилазы 28 - 100 ед/л, панкреатической амилазы - 0 - 50 ед/л. Уровень повышается при панкреатитах, кистах поджелудочной железы, сахарном диабете, холецистите , травме живота, прерывании беременности.
Щелочная фосфатаза
Фермент, оказывающий влияние на обмен фосфорной кислоты и участвующий в переносе фосфора в организме. Норма у женщин до 240 ед/л, у мужчин до 270 ед/л. Уровень щелочной фосфатазы увеличивается при различных заболеваниях костей, рахите, миеломной болезни, гиперпаратиреозе, инфекционном мононуклеозе , заболеваниях печени. Снижение её характерно для гипотиреоза, нарушений роста костей,
И желчи, затем через зонд вводят 40- 50 мл 25—30 % теплого раствора сернокислой магнезии или других раздражителей: пептона, эфира, желтка или наиболее сильного раздражителя — гипофизина (1% раствор питуитрина 1 мл под кожу). Через 5- 10 мин собирают порцию В — желчь из желчного пузыря, которой обычно бывает около 50—60 мл, она темного цвета. Появление более светлой желчи (порция С) указывает на истечение ее из печеночных протокоь. Желчь каждой порции подвергается исследованию.
Непрямая реакция наблюдается при гемолитической желтухе . Для обтурационных желтух положительны обе реакции.
Раздельное определение прямого и непрямого билирубина крови .
Увеличение стеркобилина наблюдается при усиленном гемолизе, при выделении накопившегося пигмента в тканях во время желтухи и при поносах .
Определение уробилина в моче. Выделение его в количестве более 25 мг за сутки (определяется в суточном количестве мочи) указывает на нарушение пигментного обмена и наблюдается при циррозах , при желтухах печеночно-клеточного происхождения и других заболеваниях печени. В норме уробилин в моче не определяется.
Исследование метаболических функций печени , т. е. процессов промежуточного обмена, определяется следующими методами:
Определение холестерина в крови. В норме количество холестерина в крови по методу: Аутентрита 140-
180 мг%, Энгальгарта и Смирновой- 125—170 мг%, Блюра 169—240 мг%. Повышение холестерина в крови наблюдается при диабете до 1000 мг%, при обтурационной желтухе — до 300 мг%, при паренхиматозной желтухе — до 240 мг%. При гемолитической желтухе количество холестерина в крови не изменяется.
Проба с нагрузкой галактозы
Накануне вечером больной принимает пищу без углеводов. В 20 часов после опорожнения мочевого пузыря больной принимает в 400 мл чая 40 г галактозы. Собирают мочу до 8 часов утра и определяют в ней галактозу. Здоровая печень усваивает 38 г галактозы из 40 введенных. Выделение с мочей за 12 часов больше 3 г галактозы считается патологией и наблюдается при гепатитах , циррозах , сифилисе печени . При механической желтухе — проба отрицательная.
Проба с голоданием
После ужина больной голодает до 12 часов следующего дня. Каждые 4 часа определяют сахар в крови. У здорового человека, несмотря на голодание, уровень сахара в крови к вечеру повышается. У больных с заболеванием печени и с недостаточностью надпочечников сахар в крови беспрерывно снижается.
«Прямая кишка-л ёгкие» проба
Березнеговского-Елекера симптом
Иррадиация болей в правое надплечье при желчнокаменной болезни .
Боаса симптом
Болезненность при надавливании на 12 ребро справа от остистого отростка. Наблюдается при холециститах .
Георгиевского симптом
Пальпация правой надключичной области вызывает боль. Симптом наблюдается при заболеваниях печени и желчных путей.
Проба Вельтмана 0,4-0,5 мл р-ра Са (V-VII пробирка)
Коллоино-осадочная реакция Вельтмана, основанная на образовании преципитата белков под влиянием хлористого кальция, может изменяться в двух направлениях: в сторону укорочения коагуляционной ленты (полосы) или ее удлинения.
К удлинению полосы приводят усиление разрастания соединительной ткани в органах (фиброз), пролиферация тканей, ускорение деления клеток, разрушение эритроцитов (гемолитические состояния), повреждение паренхимы печени. Удлинение полосы отмечается при вирусном гепатите, циррозе, острой желтой атрофии печени, малярии, после переливания крови, аутогемотерапии и при многих воспалительных заболеваниях (пневмония, плеврит, туберкулез легких). Удлинение коагуляционной ленты может вызываться и повышением содержания гамма-глобулинов, снижающих коллоидную стабильность сыворотки.
Укороченеи обнаруживается при острых воспалительных и экссудативных процессах, при которых увеличивается содержание альфа- и бета-глобулинов и за счет этого повышается стабильость сыворотки крови, а именно: при экссудативной фазе ревматизма, активном туберкулезе легких, нефротическом синдроме, макроглобулинемии Вальденстрема, альфа-2-, бета-плазмоцитомах, злокачественных опухолях, экссудативном перитоните, некрозах (омертвении, разрушении тканей), острых инфекционных заболеваниях. Крайнее укорочение полосы (отрицательная проба) наблюдается у больных острым ревматизмом.
Сулемовая проба 1,6-2,2 мл дихлорида ртути
Сулемовая проба (реакция Таката — Ара) — это реакция флоккуляции, применяемая при исследовании функции печени. Сулемовая проба основана на способности сывороточного альбумина поддерживать устойчивость коллоидного раствора хлорной ртути и карбоната натрия. При изменении соотношения между белковыми фракциями плазмы крови в сторону глобулинов, которое чаще всего возникает при нарушении функции печени, устойчивость коллоидов нарушается, и из раствора выпадает хлопьевидный осадок.
В норме образования хлопьевидного осадка не происходит. Реакция считается положительной, если осадок наблюдается не менее чем в 3 пробирках.
Сулемовая проба не является строго специфической и бывает положительной как при паренхиматозных поражениях печени, так и при некоторых новообразованиях, ряде инфекционных заболеваний и др.
Тимоловая проба 0-5 ед. SH
Тимоловая проба — проба для определения функционального состояния печени. Она основана на свойстве насыщенного раствора тимола в вероналовом буфере с рН=7,8 давать с сывороткой крови помутнение. Степень мутности тем больше, чем выше содержание в сыворотке гамма-глобулинов (при одновременном падении содержания альбуминов). Степень мутности определяют обычно нефелометрически, сравнивая мутность пробы с мутностью серии стандартных суспензий сульфата бария, одну из которых принимают за единицу. В норме мутность равна от 0 до 4,7 единиц. Повышенные показатели тимоловой пробы свидетельствуют о повышении в крови концентрации α-, β- и γ-глобулинов и липопротеидов, что чаще всего наблюдается при заболеваниях печени. В то же время тимоловая проба не является абсолютно специфичной, так как может быть повышенной при некоторых инфекционных заболеваниях и новообразованиях.